Naslov Povezanost izraženosti osteopontina i vaskularnog endotelnog čimbenika rasta s angiogenim parametrima i njihova prognostička vrijednost u monoklonalnoj gamapatiji neodređenog značenja i multiplom mijelomu : doktorski rad
Naslov (engleski) The expression of osteopontin and vascular endothelial growth factor in correlation with parameters of angiogenesis and their prognostic significance in monoclonal gammopathy of undetermined significance and multiple myeloma : doctoral thesis
Autor Emina Babarović
Mentor Nives Jonjić (mentor)
Član povjerenstva Nije poznat predsjednik povjerenstva Nije poznat predsjednik povjerenstva (predsjednik povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj Sveučilište u Rijeci Medicinski fakultet Rijeka
Datum i država obrane 2014-01-01, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO Kliničke medicinske znanosti Patologija
Univerzalna decimalna klasifikacija (UDC ) 616 - Patologija. Klinička medicina
Sažetak Ciljevi istraživanja: Monoklonalna gamapatija neodređenog značenja (MGUS) je premaligno stanje koje gotovo uvijek prethodi nastanku multiplog mijeloma (MM), no rizični čimbenici za nastanak i progresiju MGUS-a su nejasni. Iako angiogeneza igra
važnu ulogu u progresiji bolesti, a njezina inhibicija je prepoznata kao obećavajući pristup u liječenju, molekularni mehanizmi, izražaj angiogenih čimbenika te angiogeni potencijal koštane srži u različitim stadijima ove bolesti su i dalje nerazjašnjeni. Stoga je glavni cilj našeg istraživanja bio detaljna analiza tumorske angiogeneze u koštanoj srži bolesnika s MGUS-om i MM-om u kontekstu izražaja osteopontina (OPN) i vaskularnog endotelnog čimbenika rasta (VEGF). Pored toga, željeli smo i utvrditi prognostičku ulogu ispitivanih angiogenih čimbenika i tumorske vaskularizacije u bolesnika s MM-om.
Ispitanici i metode: U istraživanje je uključeno 95 bolesnika, 14 bolesnika s MGUSom, 13 bolesnika s asimptomatskim mijelomom (AMM) i 68 bolesnika s aktivnim MM-om, sa svim potrebnim kliničkim podatcima te dovoljnom količinom očuvanog
bioptičkog materijala koštane srži. Za kvantifikaciju angiogenih parametara uz klasičnu metodu utvrđivanja gustoće krvnih žila (MVD) koristili smo i računalno potpomognutu analizu slike koja nam je omogućila izračunavanje broja krvnih žila po mm2, površine krvnih žila po mm2, srednjeg promjera krvnih žila i ukupne vaskularne površine (TVA) na bioptičkim uzorcima koštane srži obojanim s anti-CD34. Za određivanje izražaja OPN-a i VEGF-a u plazma stanicama korištena je dvostruka imunohistokemijska metoda CD138+OPN i CD138+VEGF, a pregledom cijelog uzorka određen je postotak i jačina obojanosti plazma stanica te je izražen kao histološki skor. Izražaj OPN-a određivan je i u izvanstaničnom matriksu (iOPN) semikvantitativno u dvije kategorije kao pozitivan ili negativan.
Rezultati: Utvrdili smo značajnu pozitivnu povezanost ispitivanih proteina s angiogenim parametrima u ranom stadiju bolesti (MGUS) te obrat u kasnijim fazama bolesti s jasnom negativnom korelacijom u uznapredovaloj fazi (kliničkom stadiju III
prema Durie-Salmonu). Svi analizirani angiogeni parametri, osim srednjeg promjera krvnih žila značajno su viši u skupini bolesnika s difuznim tipom plazmastaničnih infiltrata, prisutnom fibrozom u koštanoj srži, aktivnim MM-om, višim kliničkim
stadijem bolesti te evidentnom koštanom bolesti. Nadalje, viši MVD (p=0.004) i veći broj krvnih žila po mm2 (p= 0.028) značajni su negativni prognostički pokazatelji odgovora na prvu liniju terapije u bolesnika s aktivnim MM-om. Negativni izražaj
iOPN-a (p=0.002) i viši angiogeni parametri, MVD (p=0.05), TVA (p=0.008), broj krvnih žila po mm2 (p=0.009) i površina krvnih žila po mm2 (p=0.02) povezani su s kraćim ukupnim preživljenjem bolesnika s MM-om. U univarijatnoj analizi postotak
VEGF pozitivnih tumorskih stanica pokazao se kao značajan prognostički pokazatelj utjecaja na trogodišnje preživljenje bolesnika s aktivnim MM-om (omjer izgleda: 5.25, p=0.03; omjer rizika: 0.44, p=0.04), no u multivarijatnoj analizi nije zadržao
značajnost.
Zaključci: Rezultati našeg istraživanja doprinijeli su boljem razumijevanju uloge VEGF-a i OPN-a u procesu angiogeneze u koštanoj srži bolesnika s MGUS-om i MM-om, te ukazali na moguću ključnu ulogu ovih proteina u aktivaciji procesa
angiogeneze u ranom stadiju bolesti. Objektivna metoda procjene angiogeneze u uzorcima koštane srži s manjim plazmastaničnim infiltratima mogla bi postati dio rutinske patohistološke obrade bolesnika koja bi pomogla u prepoznavanju
podskupina bolesnika u ranim fazama bolesti s eventualnim agresivnijim tijekom i lošijim odgovorom na terapiju.
Sažetak (engleski) Objectives: Multiple myeloma (MM) is nearly always preceded by premalignant condition, monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS), but at present time we are lacking reliable risk factors and predictors for its progression. Bone marrow angiogenesis plays an important role in the pathogenesis and progression of disease and its inhibition has been recognized as a promising approach in the treatment of patients with MM. The biology behind gradual increase in extent of bone marrow angiogenesis is unclear, and differences in angiogenic cytokine expression and bone marrow angiogenic potential among the various stages of the disease are not fully understood. Therefore the main aim of this study was to evaluate tumor angiogenesis parameters in detail and to correlate them with the expression of
osteopontin (OPN) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the bone marrow specimens of patients with MGUS and MM. Additionally, we wanted to determine their prognostic significance in MM.
Patients and Methods: Ninety-five patients were enrolled in this study; 14 diagnosed with MGUS, 13 with asymptomatic myeloma (AMM) and 68 with active MM, accompanied with all clinical data and adequate bone marrow biopsy specimens. In addition to traditional method of evaluation angiogenesis by counting microvessel density (MVD) a computer assisted image analysis was used to determine the total count of microvessels per square millimetre, area occupied by microvessels per square millimetre, mean diameter of microvessels and the area occupied by microvessels (as a percentage of the total section area, TVA) on samples immunohistochemically stained with anti-CD34. Double immunohistochemical methods CD138+VEGF and CD138+OPN were used to evaluate expression of VEGF and OPN in bone marrow plasma cells. The expression of OPN has also been studied in extracellular matrix (iOPN) and scored semiquantitatively in two categories, positive and negative.
Results: A significant positive correlation was determined between analyzed proteins and angiogenic parameters in the MGUS stage of the disease. In the successive stages of the disease a reversal of the correlation from positive to negative was found with a significant negative correlation in advanced stage (clinical stage III according to Durie-Salmon). All analyzed angiogenic parameters, except mean diameter of microvessels, were significantly higher in the patients with diffuse pattern of bone marrow infiltration, bone marrow fibrosis, active MM, higher clinical stage and evident bone lesions. Furthermore we found that MVD (p=0.004) and total count of microvessels per square millimetre (p=0.028) are important prognostic indicators of patient response to the first-line therapy. The overall survival rates were significantly
shorter in patients with negative iOPN (p=0.002) and higher angiogenic parameters, MVD (p=0.05), TVA (p= 0.008), total count of microvessels per square millimetre (p=0.009) and area occupied by microvessels per square millimetre (p=0.02). Positive VEGF expression in our model predicted a better three-year survival of patients with active MM (OR: 5.25, p=0.03; HR: 0.44, p=0.04). Conclusion: The results of our study have contributed to a better understanding of the
role of VEGF and OPN in the process of bone marrow angiogenesis in patients with MGUS and MM. Our findings in MGUS support the key role of these proteins in the induction of angiogenesis. We believe that computerized microvessel determination could be used as a reliable and more accurate method for quantification of tumor angiogenesis in bone marrow samples of patients with lower plasma cell infiltration. This additional spectrum of information regarding quantity and quality of angiogenesis would enable identifying subset of patients in the early stages of the disease with different course of the disease and poor response to therapy.
Ključne riječi
Angiogeneza
Imunohistokemija
Monoklonalna gamapatija neodređenog značenja
Multipli mijelom
Osteopontin
Prognoza
Vaskularni endotelni čimbenik rasta.
Ključne riječi (engleski)
Angiogenesis
Immunohistochemistry
Monoclonal gammopathy of undetermined significance
Multiple myeloma
Osteopontin
Prognosis
Vascular endothelial growth factor.
Jezik hrvatski
URN:NBN urn:nbn:hr:188:365848
Datum promocije 2020
Studijski program Naziv: Biomedicina Vrsta studija: sveučilišni Stupanj studija: poslijediplomski doktorski Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo (dr.sc)
URL zapisa u katalogu http://libraries.uniri.hr/cgi-bin/ucat/unilib.cgi?form=D1130418022
Vrsta resursa Tekst
Opseg 143 str; 30 cm
Način izrade datoteke Izvorno digitalna
Prava pristupa Zatvoreni pristup
Uvjeti korištenja
Repozitorij Repozitorij Sveučilišne knjižnice Rijeka
Datum i vrijeme pohrane 2017-01-19 18:56:12